培养活性污泥需要有菌种和菌种所需要的营养物。菌种的来源有以下几个。
（1）从其他同类活性污泥法处理厂运进活性污泥作为种子。
（2）城市污水中含有的菌种。
（3）原有沟道出口处的河泥或沟道中的淤泥，用河水淘洗、沉去沙石，把浑水用泵吸送到曝气池中作为活性污泥种子。
（4）初沉池和消化池的污泥作菌种。
有了菌种，便可以开始培养。由于城市污水既具备菌种，又具备菌种所需的营养物，故使用城市污水作菌种可直接培养；而其他来源的菌种，则还要加上一些必需的营养物质，如粪便及化学肥料。用城市污水直接培养活性污泥可采用进水-闷曝-沉淀（留泥）-再进水的间歇运行方式，或用少量进水的连续运行方式来积累活性污泥。
粪便水、生活污水或以生活污水为主的城市污水中既含有丰富的营养物，又含有种类繁多的细菌，故活性污泥一般先用粪便水或生活污水来培养。
